El kit de enumeración de células madre BD ha atraído una atención significativa en el campo de la citometría de flujo por su capacidad para enumerar con precisión las células CD34+. Para validar su eficacia y establecer su equivalencia con los métodos existentes, se realizó una evaluación en varios sitios en la que participaron cuatro sitios clínicos especializados en la enumeración de CD34+ por citometría de flujo.Este estudio integral tuvo como objetivo evaluar la concordancia entre los sistemas BD FACSCanto II y BD FACSCalibur con el método predicado, que utilizó Beckman Coulter StemKit y StemTrol. Al analizar muestras sobrantes y desvinculadas de pruebas de citometría de flujo clínica, los investigadores buscaron determinar la confiabilidad y consistencia del kit de enumeración de células madre BD en varios tipos de muestras y métodos de preparación.
Métodos y materiales
Se recogieron un total de 1032 muestras de sangre normal y movilizada, médula ósea congelada y descongelada, leucoféresis y sangre del cordón umbilical. Estas muestras fueron anticoaguladas con una variedad de sustancias, incluyendo citrato fosfato dextrosa, anticoagulante citrato dextrosa-solución A, heparina y etilendiaminotetraacetato, solos o en combinación.Para garantizar la equivalencia del sitio para la preparación, prueba y análisis de muestras, se analizaron muestras frescas de leucoféresis. Se utilizaron los sistemas BD FACSCanto II y BD FACSCalibur para analizar las muestras, con parámetros de activación óptimos establecidos para BD FACSCanto II y activación manual para BD FACSCalibur.
Resultados
El sesgo relativo medio demostró concordancia dentro de los parámetros predefinidos tanto para BD FACSCanto II (-2,81 a 4,31 ±7,1) como para BD FACSCalibur (-2,69 a 5,2 ±7,9). Estos resultados indican que el kit de enumeración de células madre BD proporciona una enumeración de células CD34+ precisa y consistente comparable al método predicado.Los análisis de sesgo de la distribución de los valores predicados de rango bajo, medio y alto mostraron una concordancia utilizando ambos métodos de investigación. Los análisis de regresión de Deming revelaron una relación lineal con R(2) > 0,92 para ambos métodos, lo que respalda aún más la confiabilidad y consistencia del kit de enumeración de células madre BD.
Discusión
Los hallazgos de esta evaluación en múltiples sitios proporcionan evidencia sólida de que el kit de enumeración de células madre BD es una herramienta valiosa para la enumeración de células CD34+. Su precisión y coherencia entre diferentes tipos de muestras y métodos de preparación lo convierten en una opción confiable para laboratorios clínicos e instituciones de investigación.La capacidad del kit para enumerar células CD34+ viables, así como el porcentaje de células CD34+ viables en poblaciones CD45+ y CD45+ viables, lo hace particularmente útil para evaluar los resultados del trasplante de células madre hematopoyéticas y monitorear la progresión de la enfermedad en neoplasias hematológicas.En general, el kit de enumeración de células madre BD ha demostrado ser un método eficaz y confiable para la enumeración de células CD34+, proporcionando información valiosa sobre la biología de las células madre hematopoyéticas y sus aplicaciones clínicas.
