Introducció
El kit d’enumeració de cèl·lules mare BD ha obtingut una atenció important en el camp de la citometria de flux per la seva capacitat per enumerar amb precisió les cèl·lules CD34+. Per validar la seva eficàcia i establir-ne l’equivalència amb els mètodes existents, es va dur a terme una avaluació de diversos llocs que va incloure quatre llocs clínics especialitzats en l’enumeració de CD34+ per citometria de flux.
Aquest estudi exhaustiu tenia com a objectiu avaluar l’acord entre els sistemes BD FACSCanto II i BD FACSCalibur amb el mètode de predicats, que utilitzava el Beckman Coulter StemKit i StemTrol. Mitjançant l’anàlisi de mostres sobrants i desenllaçades de proves clíniques de citometria de flux, els investigadors van intentar determinar la fiabilitat i la coherència del kit d’enumeració de cèl·lules mare BD en diversos tipus de mostres i mètodes de preparació.
Mètodes i Materials
Es van recollir un total de 1.032 exemplars de sang normal i mobilitzada, medul·la òssia congelada i descongelada, leucoféresi i sang de cordó. Aquestes mostres es van anticoagular amb una varietat de substàncies, com ara citrat fosfat dextrosa, anticoagulant citrat dextrosa solució A, heparina i etilendiaminotetraacetat, sols o en combinació.
Per garantir l’equivalència del lloc per a la preparació, prova i anàlisi de mostres, es van analitzar mostres fresques de leucofèresi. Es van utilitzar els sistemes BD FACSCanto II i BD FACSCalibur per analitzar els exemplars, amb paràmetres de gating òptims establerts per al BD FACSCanto II i el control manual per al BD FACSCalibur.
Resultats
El biaix relatiu mitjà va demostrar un acord dins dels paràmetres predefinits tant per al BD FACSCanto II (-2,81 a 4,31 ± 7,1) com per a BD FACSCalibur (-2,69 a 5,2 ±7,9). Aquests resultats indiquen que el kit d’enumeració de cèl·lules mare BD proporciona una enumeració de cèl·lules CD34+ precisa i coherent comparable al mètode del predicat.
Les anàlisis de biaix de la distribució dels valors de la part baixa, mitjana i alta del predicat van mostrar un acord mitjançant els dos mètodes d’investigació. Les anàlisis de regressió de Deming van revelar una relació lineal amb R (2) > 0, 92 per als dos mètodes, donant suport encara més a la fiabilitat i la coherència del kit d’enumeració de cèl·lules mare BD.
Discussió
Els resultats d’aquesta avaluació de diversos llocs proporcionen una evidència sòlida que el kit d’enumeració de cèl·lules mare BD és una eina valuosa per a l’enumeració de cèl·lules CD34+. La seva precisió i consistència en diferents tipus de mostres i mètodes de preparació el converteixen en una opció fiable per a laboratoris clínics i institucions de recerca.
La capacitat del kit per enumerar cèl·lules CD34+ viables, així com el percentatge de cèl·lules CD34+ viables en poblacions CD45+ i CD45+ viables, el fa especialment útil per avaluar els resultats del trasplantament de cèl·lules mare hematopoètiques i controlar la progressió de la malaltia en malalties hematològiques malignes.
En general, el kit d’enumeració de cèl·lules mare BD ha demostrat ser un mètode eficaç i fiable per a l’enumeració de cèl·lules CD34+, proporcionant informació valuosa sobre la biologia de les cèl·lules mare hematopoètiques i les aplicacions clíniques.
